ब्रैडफोर्ड प्रोटीन परख समीकरण को समझना: एक व्यापक मार्गदर्शिका


उत्पादन: कैलकुलेट दबाएँ

सूत्र:-Cब्रैडफोर्ड-=-(A595---Aखाली)-/-k

ब्रैडफोर्ड-प्रोटीन-एस्से-समीकरण-को-समझना

ब्रैडफोर्ड-प्रोटीन-एस्से-एक-त्वरित-और-सटीक-स्पेक्ट्रोस्कोपिक-विश्लेषणात्मक-प्रक्रिया-है-जिसका-उपयोग-एक-समाधान-में-प्रोटीन-की-सांद्रता-को-मापने-के-लिए-किया-जाता-है।-यहां-टूट-फूट-का-विवरण-दिया-गया-है:

पैरामीटर्स-का-उपयोग:-उदाहरण-और-व्याख्याएं

कल्पना-कीजिए-कि-आपके-पास-एक-नमूने-का-समाधान-है,-और-आपने-इसे-एक-स्पेक्ट्रोफोटोमीटर-में-रखा।-595-नैनोमीटर-पर-अवशोषण-को-0.5-के-रूप-में-दर्ज-किया-गया,-और-ब्लैंक-के-लिए-यह-0.1-था।-बीएसए-मानक-वक्र-(k)-से-प्राप्त-ढलान-0.2-मिलीग्राम/मिलीलीटर-प्रति-अवशोषण-इकाई-है।-इसको-हमारे-समीकरण-में-डालने-पर,-प्रोटीन-सांद्रता-Cब्रैडफोर्ड-निम्नलिखित-रूप-में-गणना-की-जाएगी:

Cब्रैडफोर्ड-=-(0.5---0.1)-/-0.2-=-2-मिलीग्राम/मिलीलीटर

परिणाम:

लिनियर-रेंज-और-सटीकता

यह-ध्यान-रखना-महत्वपूर्ण-है-कि-ब्रैडफोर्ड-एस्से-की-एक-प्रचलित-लाइनियर-रेंज-होती-है-(आमतौर-पर-1-100-माइक्रोग्राम/मिलीलीटर-प्रोटीन)।-इस-सीमा-से-परे,-सटीकता-घटती-है-और-परिणाम-असंगत-हो-सकते-हैं।-इसका-मतलब-है-कि-ढलान-k-को-मानक-प्रोटीन-जैसे-बायोवाइन-सीरम-एल्ब्यूमिन-(बीएसए)-का-उपयोग-करके-एक-नियंत्रित-सेटअप-में-सटीक-रूप-से-निर्धारित-किया-जाना-चाहिए।

डेटा-वैलिडेशन-और-प्रयोगात्मक-स्थितियां

सटीक-परिणाम-प्राप्त-करने-के-लिए-सभी-मानों-का-उपयुक्त-दायरे-में-होना-आवश्यक-है।-विचलन,-जैसे-595-नैनोमीटर-के-अलावा-किसी-अन्य-तरंगदैर्ध्य-का-उपयोग-करने-से-परिणाम-विशेष-रूप-से-गलत-हो-सकते-हैं।

अक्सर-पूछे-जाने-वाले-प्रश्न-(FAQs)

सारांश

ब्रैडफोर्ड प्रोटीन एस्से समीकरण एक समाधान में प्रोटीन सांद्रता निर्धारण के लिए जैव रसायन में एक अमूल्य उपकरण है। विचार किए जाने वाले महत्वपूर्ण कारकों में सटीक मानक वक्र उत्पत्ति और सही अवशोषण माप शामिल हैं।

Tags: जैव रसायन, प्रोटीन परख, प्रयोगशाला तकनीक