掌握布拉德福德蛋白质测定计算以实现精确的蛋白质定量

公式：蛋白质浓度-=-(吸光度---截距)-/-斜率

布拉德福德蛋白质测定法计算简介

布拉德福德蛋白质测定法是一种快速准确的蛋白质浓度测定方法。这种技术基于考马斯亮蓝染料与蛋白质的结合，导致颜色变化，可以使用分光光度计测量颜色变化的程度，颜色变化的程度与蛋白质浓度成正比。

用于计算蛋白质浓度的公式是：

蛋白质浓度-=-(吸光度---截距)-/-斜率

结果蛋白质浓度以微克每毫升（µg/mL）表示。

让我们通过一个例子来看看计算是如何进行的：

使用公式，我们可以计算蛋白质浓度：

蛋白质浓度 = (0.75 0.1) / 1.5

这产生了：

蛋白质浓度 = 0.43 µg/mL。

考虑一个研究实验室，科学家们正在量化各种细胞裂解物中的蛋白质量。他们进行了布拉德福德蛋白质测定，发现一个样品的吸光度为 0.65。根据以前的实验，他们知道截距是 0.08，斜率是 1.4。将这些值代入公式：

蛋白质浓度 = (0.65 0.08) / 1.4

这产生了：

蛋白质浓度 = 0.41 µg/mL。

这个快速准确的测量帮助研究人员继续他们的实验，确保他们在正确的蛋白质浓度下工作。

在进行布拉德福德蛋白质测定时可能会出现一些常见问题：

答：稀释您的样品，使其吸光度在标准曲线范围内，然后重新计算浓度。

答：布拉德福德蛋白质测定专为测量 595 nm 的吸光度而设计。使用不同的波长可能导致结果不准确。

答：每次进行测定时准备新鲜的标准品，并准确测量。使用多个重复样本并取平均值。